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CDCFDA,SE绿色荧光染料为细胞质染色探针，具有490/515nm的最大激发/发射波长。可以选择性标记细胞质，只需要纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞。可自由穿过细胞膜，适用于观察细胞质内部生物合成及相关发病机理。

CDCFDA,SE细胞质绿色荧光探针有极强的疏水性，能够轻易穿透活细胞膜，进入细胞后，被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子，从而被滞留在细胞内，使胞质发出强绿色荧光。绿色荧光产物的最大激发波长490nm，最大发射波长520nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为510～530nm。可以使用流式细胞仪或激光共聚焦显微镜检测细胞。

• 染料短期2周内可2～8℃保存。染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
  
• 染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
  
• 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

• 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
  
• CDCFDA,SE染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
  
• 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
  
• CDCFDA,SE探针容易受潮，受潮后稳定性较差，注意干燥保存。
  
• 吸取CDCFDA,SE探针母液时要用干燥的新吸头，不能使用含水的吸头。
  
• 未使用完的CDCFDA,SE探针母液请拧紧螺旋盖，避免受潮失效。
  
• CDCFDA,SE探针工作液含水，配制后不可以长期保存，须现配现用。
  
• 细胞处理需要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。
  
• 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
  
• 贴壁细胞可以制备成细胞悬液染色，也可以原位染色，请根据试剂样本需要染色。
  
• 染色后立即进行分析。

• 染色工作液配制：
  根据样本数量，用无血清培养基或HBSS将CDCFDA,SE荧光染料1000倍稀释，配制成染色工作液。
  注：
  ① 开始实验前，使用HBSS缓冲液或无血清培养基稀释CDCFDA,SE探针到需要的工作浓度。工作浓度为根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度，一般染色终浓度为试剂盒中染料母液的500～1000倍稀释。1000倍稀释适合大多数细胞样本。
  ② 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行分装，每次使用一管，试剂-20℃避光冻存，一年稳定。
  ③ 工作液现配现用。
  ④ 不同的细胞需要根据预实验结果确定最佳染色浓度。如果荧光强度弱，可以适当提高CDCFDA,SE的终浓度。如果背景太高，可以适当降低CDCFDA,SE的终浓度，请摸索条件找到最佳浓度。
  ⑤ 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，荧光信号会衰减。
  
• 细胞染色
  
  • 对于贴壁细胞
    
    • 将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
      
    • 待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育20分钟～2小时(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
      
    • 利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。
      注：若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
  • 对于悬浮细胞
    
    • 离心，吸除上清。
      
    • 用37℃预热探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育20分钟～2小时(具体时间需根据细胞类型定)。
      注：
      ① 悬浮细胞，也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上，然后用类似贴壁细胞方法进行染色。
      ② 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
      
    • 离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
      
    • 置于荧光镜下观察。
• 观察结果：
  在荧光显微镜(含合适滤片)下观察细胞。最大激发/发射波长为490/515nm。